单位定义
一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内酶切 1 µg λ DNA(dam-/HindIII 消化)所需的酶量。
反应条件
1X rCutSmart™ 缓冲液
Incubate at 37°C
1X rCutSmart™ 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 µg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25°C)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer™ r1.1: <10%
NEBuffer™ r2.1: 100%
NEBuffer™ r3.1: 75%
rCutSmart™ Buffer: 100%
稀释兼容性
贮存溶液
10 mM Tris-HCl
50 mM NaCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
200 µg/ml Recombinant Albumin
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25°C
热失活
65°C for 20 minutes
甲基化敏感性
dam 甲基化: 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切
dcm 甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 不敏感